ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DA BACTÉRIA PECTOBACTERIUM CAROTOVARUM, AGENTE CAUSADOR DA PODRIDÃO MOLE EM HORTALIÇAS

Abstract

A propagação de fitopatógenos que provocam doenças de complexo controle, como a podridão mole, impactam negativamente o mercado de hortaliças. Uma das principais causas dessa doença são espécies de Pectobacterium spp., como a P. carotovorum e a P. brasiliense. Essas bactérias Gram negativas infectam diversos vegetais popularmente consumidos e têm impacto econômico relevante no Brasil. Dessarte, o presente estudo visou caracterizar e isolar cepas de P. carotovorum, para, em estudos subsequentes, avaliar o potencial de utilização de bacteriófagos no controle desse fitopatógeno. A primeira etapa do isolamento envolveu a coleta de hortaliças doentes e a inoculação em pimentões com material obtido dos tecidos lesionados. A maceração dos tecidos de pimentão, no período de 24 a 48 horas após a inoculação, é compatível com infecção por Pectobacterium. Nos casos de resultado positivo, realizamos o isolamento da cepa bacteriana utilizando meio de cultura CVP-S2 modificado. As colônias que se multiplicaram nesse meio e apresentaram características típicas de Pectobacterium foram semeadas em meio ágar MacConkey. Posteriormente, as amostras foram submetidas à análise microscópica pelo método de Gram. Duas cepas foram selecionadas e identificadas como CVP-1 e CVP-2. O DNA dessas cepas foi extraído, o gene 16S sintetizado pela PCR, e os dois amplicons sequenciados pelo método de interrupção de cadeia. As sequências foram analisadas usando a plataforma Blast nucleotide, que compara com sequências depositadas no Genbank. Os resultados indicaram que ambas as bactérias isoladas pertencem ao gênero Pectobacterium e possuem alta similaridade com sequências do gene 16S de cepas da espécie P. brasiliense.