ESTRATÉGIA PARA PROMOVER A RECOMBINAÇÃO HOMÓLOGA ENTRE FAGOS DE Pseudomonas aeruginosa

Resumo

seudomonas aeruginosa é uma espécie bacteriana composta por organismos gramnegativos, capazes de subsistir nos mais diversos ambientes, sendo causadores de infecções em indivíduos imunocomprometidos, portadores de fibrose cística e em queimaduras. A P. aeruginosa é considerada uma ameaça à saúde pública devido à sua resistência a diversas classes de antibióticos, sendo crucial o desenvolvimento de tratamentos alternativos, como a fagoterapia, que consiste no uso terapêutico de bacteriófagos de ciclo lítico visando o controle de bactérias patogênicas. Uma das maiores limitações dessa técnica é, porém, a alta especificidade de hospedeiros geralmente apresentada pelos fagos, já que um mesmo tipo de fago que é altamente virulento contra uma determinada cepa bacteriana pode ser totalmente inócuo ou apresentar baixa virulência a outras cepas da mesma espécie - nesse último caso, a cepa bacteriana é considerada parcialmente sensível. Essa característica torna necessário o desenvolvimento de métodos de melhoramento genético dos fagos visando o aumento da amplitude de hospedeiros assim como o aumento da virulência. Sendo assim, este projeto teve como objetivo analisar a viabilidade de promover a recombinação homóloga através da inserção de DNA viral em bactérias por meio da transformação e investigar a possibilidade de aumento da virulência dos fagos BrSP1 e BrSP7 através da recombinação homóloga promovida pela transformação de células competentes nas cepas ATCC® 27853 e SWSM04 de P. aeruginosa com o DNA dos dois fagos previamente citados. Embora os resultados dos experimentos realizados indiquem que não houve recombinação entre os DNAs dos fagos BrSP1 e BrSP7, todas as demais etapas, como extração do material genético, preparo das células competentes e transformação, se mostraram bem-sucedidas, sendo essencial a realização de novos estudos com a adaptação de técnicas e diferentes combinações de bacteriófagos, uma vez que tais métodos podem se mostrar uma ferramenta promissora para a viabilização da fagoterapia.