VALIDAÇÃO DE MÉTODO PARA DETECÇÃO E GENOTIPAGEM DE PAPILOMAVÍRUZ HUMANO (HPV) DE ALTO E BAIXO RISCO ONCOLÓGICO POR NESTED MULTIPLEX PCR, EM AMOSTRAS DA CÉRVICE UTERINA DE PACIENTES COM DIAGNÓSTICO CITOLÓGICO DE CÉLULAS GLANDULARES ATÍPICAS

Abstract

A descoberta de que a infecção persistente pelo papilomavirus humano (HPV) é um fator necessário para o desenvolvimento do câncer do colo do útero, levou a procura de novas estratégias para o rastreamento do câncer cervical uterino baseadas na detecção do DNA do HPV. Os testes de biologia molecular têm inúmeras vantagens sobre a citologia tradicional, com maior sensibilidade para detectar câncer cérvice uterino, maior reprodutibilidade e possibilidade de automação laboratorial, porém, há ainda necessidade de validação e comprovação diagnóstica destes métodos, o que justifica o desenvolvimento deste trabalho, que teve por objetivo validar a detecção e genotipagem do HPV em amostras citológicas de raspado endocervical, além de avaliar a frequência e os subtipos de vírus presentes nas amostras. Para atingir estes objetivos, foi realizado um Nested Multiplex PCR em amostras endocervicais de 32 pacientes atendidas em um Hospital Universitário da Cidade de São Paulo, com suspeita de AGC e/ou lesões malignas ao diagnóstico convencional. Após análise dos resultados, verificou-se que o método molecular utilizado foi satisfatório para detecção do HPV em uma amostra sabidamente positiva. Todas as 32 amostras analisadas tiveram amplificação do gene controle positivo beta-globina e não foi identificada a presença de HPV em nenhuma amostra analisada. Conclui-se que o método molecular utilizado foi eficiente na detecção do HPV, porém, devido ao pequeno número de amostras incluídas, estudos maiores devem ser conduzidos para verificar a frequência e subtipos de HPV em amostras de endocérvice em mulheres com diagnóstico citológico de AGC e/ou lesões indicativas de malignidade.